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BOD（生化需氧量）是反映水体中可生物降解有机物含量的重要指标，bod测定仪通过模拟自然环境中微生物的代谢过程，测量水体在一定时间内的耗氧量。为保证测定结果的准确性和可比性，测量过程需遵循严格的要求，覆盖样品处理、仪器操作、环境控制等多个环节。 一、样品采集与预处理要求 样品的代表性是BOD测定的基础。采集水样时，需使用清洁、无污染的容器（如玻璃瓶），避免容器内壁残留的洗涤剂、有机物等干扰微生物活性。采样过程中应充满容器并密封，减少样品与空气接触，防止溶解氧含量变化——尤其是厌氧水样，需在采样后立即隔绝空气，避免氧气进入影响后续耗氧测量。 样品预处理需根据水质特性调整。若水样中含有余氯（如自来水、消毒后的废水），需加入硫代硫酸钠去除，余氯会抑制微生物活性，导致BOD值偏低，加入量需通过预实验确定，确保完全中和余氯且不引入过量干扰物质。对于浑浊水样，需通过静置沉淀或低转速离心去除大颗粒悬浮物，避免颗粒物附着微生物或消耗氧气，影响测定结果。 水样的pH值需调节至适宜范围。微生物在pH6.5-7.5的环境中活性最佳，若水样过酸或过碱，需用稀盐酸或氢氧化钠溶液调节pH至中性，调节过程中需缓慢搅拌，避免局部酸碱度剧烈变化损伤微生物。此外，对于含高浓度有机物的水样（如工业废水），需进行适当稀释，使测定过程中的耗氧量在仪器检测范围内（通常5-20mg/L），稀释用水需为经曝气除氯的纯水，并加入适量营养盐（如磷酸盐、硫酸镁），保证微生物代谢需求。 二、仪器操作规范要求 仪器的校准与调试是测量前的必要步骤。使用BOD测定仪前，需检查溶解氧电极或压力传感器的灵敏度，用饱和溶解氧水（如20℃下充分曝气的纯水）校准溶解氧读数，确保误差在允许范围内（通常±0.1mg/L）。若采用压差法测定仪，需检查密封系统的气密性，将充满水的培养瓶连接至仪器，观察压力变化是否稳定，若存在漏气，需更换密封垫或紧固接口，防止外界空气进入影响压力测量。 培养条件的控制需严格遵循标准。BOD测定通常需要在20℃±1℃的黑暗环境中培养5天（即BOD5），温度波动过大会影响微生物代谢速率，导致耗氧量偏差，因此需确保培养箱或恒温水浴的温度稳定性，定期校准温控系统。培养过程中需避免样品瓶受到震动或光照，光照可能促进藻类生长，额外消耗氧气，导致测定值偏高。 样品接种与稀释操作需规范。对于缺乏微生物的水样（如经过消毒的废水、地下水），需接种适量的微生物菌种（如市政污水处理厂的活性污泥上清液），接种量通常为水样体积的1%-5%，确保水样中微生物浓度适宜。稀释操作需使用虹吸法，避免剧烈搅拌产生气泡，稀释后的水样需轻轻摇匀，使微生物和有机物分布均匀，同时避免溶解氧含量剧烈变化。 三、环境与试剂要求 实验环境需满足微生物活性需求。实验室温度应控制在20℃左右，避免温度剧烈波动影响培养过程；空气中应避免存在挥发性有机物、消毒剂等物质，防止这些物质进入培养系统抑制微生物活性。若同时进行多个样品测定，需保证样品间无交叉污染，操作工具（如移液管、烧杯）需严格清洗消毒，避免残留物质干扰。 试剂的质量与保存直接影响测定结果。稀释用水需符合标准要求，需经曝气去除二氧化碳和挥发性有机物，同时加入磷酸盐缓冲液、硫酸镁、氯化钙等营养盐，维持水样的渗透压和营养平衡，试剂需现配现用，或在4℃下冷藏保存，有效期不超过1周。接种用的微生物菌种需保持活性，若使用商业化菌种，需严格按照说明书保存和活化，避免菌种老化或失活。 标准溶液的使用需规范。校准仪器或验证方法时，需使用葡萄糖-谷氨酸标准溶液（BOD5理论值为198mg/L），标准溶液需现配现用，保存时间不超过24小时。通过测定标准溶液的BOD值，验证仪器和操作的准确性，若标准溶液测定值与理论值偏差超过±10%，需查找原因（如试剂失效、温度控制不当）并重新测定。 四、质量控制与数据记录要求 质量控制措施需贯穿测量全过程。每批样品测定时，需同时做空白实验（仅稀释水和接种液），空白BOD值应小于1.5mg/L，若空白值过高，说明稀释水或接种液被污染，需重新制备。同时需做平行样测定，平行样的相对偏差应小于10%，确保操作的重复性，若偏差过大，需检查稀释、接种等环节是否存在操作误差。 数据记录与处理需完整准确。记录内容应包括样品信息（采样时间、地点、保存条件）、测定参数（稀释倍数、接种量、培养温度）、仪器读数、环境条件等，培养前后的溶解氧或压力变化需准确记录，按照标准公式计算BOD值。数据处理时需扣除空白值和接种液的耗氧量，确保计算结果的准确性。 测定后的样品与仪器处理需规范。培养结束后，样品需妥善处理，避免环境污染；仪器需及时清洁，溶解氧电极需按照说明书保养（如浸泡在饱和氯化钾溶液中），压力传感器需校准归零，确保下次使用时性能稳定。长期不用的仪器需做好防潮、防尘处理，定期通电检查，防止部件老化。 五、总结 BOD测定仪的测量要求涵盖样品采集预处理、仪器操作、环境控制、试剂质量、质量控制等多个方面，核心是保证水样中微生物活性适宜、培养条件稳定、操作规范无干扰。只有严格遵循这些要求，才能确保测定结果准确可靠，真实反映水体中可生物降解有机物的含量，为水环境质量评价、污水处理效果评估等提供科学依据。在实际操作中，需结合具体水样特性和仪器型号，灵活调整操作细节，同时加强质量控制，持续提升测定水平。
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